HALOFILOS EXTREMOS PDF

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El término halófilo extremo se utiliza para indicar que estos organismos no solamente son halofílicos, sino que su requerimiento de sal es muy alto, en algunos. Astrobiología y ambientes extremos con Dr. Salvador Mirete – MdlM Microorganismos Halofilos Extremos y los virus que las infectan con Josefa Anton. Referencias para la investigación Te saldrá una imagen asi en halófilos extremos en la segunda vez que parece algo aplanado eso es por la osmosis y el.

Author: Fenrisho Akilkis
Country: Barbados
Language: English (Spanish)
Genre: Education
Published (Last): 7 June 2005
Pages: 147
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ISBN: 532-4-33112-329-6
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Procedimientos y composiciones para la biosintesis recombinante de n-alcanos Methods and compositions for the recombinant biosynthesis of n-alkanes. Campo de la invenci6n Invenci6n field. La presente divulgacion se refiere a procedimientos para conferir propiedades productoras de alcanos a una The present disclosure relates to methods for producing conferring properties to alkanes.

Antecedente de la invenci6n History of the invenci6n. Muchos organismos fotoautotrofos existentes es decir, plantas, algas, y bacterias fotosinteticas son poco adecuados para el bioprocesamiento industrial y no han demostrado por tanto viabilidad comercial.

Many existing photoautotrophs organisms ie plants, algae, and photosynthetic bacteria are poorly suited for industrial bioprocessing and therefore have not demonstrated commercial viability.

Aunque el deseo de una produccion biosintetica de combustibles eficaz ha conducido al desarrollo de Although the desire for effective biosynthetic production of fuels has led to the development of. Resumen de la invenci6n Summary invenci6n. La presente invencion se refiere a procedimientos para producir productos de interes basados en carbono utilizando los genes AAR y ADN, las proteinas y las celulas hospedadoras descritas en el presente documento.

The present invention relates to methods for producing carbon-based interest using DNA AAR and genes, proteins and host cells described herein. En particular, la presente invencion proporciona un procedimiento para producir hidrocarburos que comprende: In particular, the present invention provides a process for producing hydrocarbons comprising: Ii exposing said genomanipulada cyanobacterium light and carbon dioxide, wherein said exposure results in the conversion of the carbon dioxide by said genomanipulada cyanobacteria n-alkanes, wherein at least one of said n-alkane is selected from the group consisting of n-tridecane, n-tetradecane, n-pentadecane, n-hexadecane, n-heptadecane and, and wherein the amount of said n-alkanes produced is at least 0.

In a related embodiment, the amount of n-alkanes produced by the cyanobacterium genomanipulada is at least 0. En una realizacion relacionada, al menos una de dichas enzimas recombinantes es heterologa con respecto a dicha cianobacteria genomanipulada. In a related embodiment, at least one of said recombinant enzymes is heterologous to said genomanipulada cyanobacterium.

En otra realizacion, dicha cianobacteria no sintetiza alcanos en ausencia de la In another embodiment, said cyanobacterium not synthesize alkanes in the absence of. En otra realizacion, al menos una de dichas enzimas AAR o ADM recombinantes no es heterologa para dicha cianobacteria genomanipulada.

In another embodiment, at least one of said enzymes or recombinant ADM AAR is not heterologous to said genomanipulada cyanobacterium. En otra realizacion relacionada del procedimiento, dicha cianobacteria genomanipulada produce al menos un nalqueno o n-alcanol. In another related embodiment of the method, said genomanipulada cyanobacterium produces at least one n-alkanol or nalqueno.

En otra realizacion mas, la cianobacteria genomanipulada produce al menos un n-alqueno o nalcanol seleccionado entre el grupo que consiste en n-pentadeceno, n-heptadeceno, y 1-octadecanol.

In another embodiment, the cyanobacterium genomanipulada produces at least one n-alkene or nalcanol selected from the group consisting of n-pentadecene, n-heptadecene, 1-octadecanol and.

En otra realizacion adicional relacionada, se selecciona al menos un n-pentadeceno producido por dicha cianobacteria genomanipulada entre el grupo que consiste en cis-3heptadeceno y cispentadeceno. In yet another embodiment related, is selected at least one n-pentadecene produced by said genomanipulada cyanobacteria from the group consisting of cis-3heptadeceno and cispentadecene.

En otra realizacion mas relacionada, se selecciona al menos un n-heptadeceno producido por dicha cianobacteria genomanipulada entre el grupo que consiste en cispentadeceno, cis-6heptadeceno, cisheptadeceno, cisheptadeceno, y cis, cis-heptadec-di-eno.

In another closely related embodiment, is selected at least one n-heptadecene produced by said exfremos cyanobacteria from the group consisting of cispentadecene, cis-6heptadeceno, cisheptadecene, cisheptadecene, and cis, cis-heptadec-di-ene. En otra realizacion mas relacionada, la extremoz genomanipulada se cultiva en un medio liquido. In another more related embodiment, the genomanipulada cyanobacteria is haloffilos in a liquid medium.

En otra realizacion mas relacionada, la cianobacteria genomanipulada se cultiva en un fotobiorreactor. In another more related embodiment, the genomanipulada cyanobacterium grown in a photobioreactor.

En otra realizacion mas relacionada, las enzimas estan codificadas por genes que son parte de un operon, donde la expresion de dichos genes esta controlada por uno o mas promotores inducibles.

In another closely related embodiment, the enzymes are encoded by genes that are part of an operon, wherein the expression of these genes is controlled by one or more inducible promoters. En otra realizacion adicional relacionada, al menos un promotor es represible por urea e inducible por nitrato. In yet another related embodiment, at least one promoter is inducible and repressible urea nitrate. En una realizacion mas relacionada, el promotor represible por urea e inducible por nitrato es un promotor de tipo nirA, En otra realizacion In a closely related embodiment, the promoter repressible galofilos inducible urea nitrate is a promoter NIRA type, in another embodiment.

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En otra realizacion relacionada, la cianobacteria genomanipulada del procedimiento es un organismo termofilo. In another related embodiment, the cyanobacterium genomanipulada procedure is a thermophilic organism. En otra realizacion mas relacionada, la cianobacteria genomanipulada del procedimiento se selecciona entre el grupo que consiste en un Synechococcus sp.

In another closely related embodiment, the cyanobacterium genomanipulada procedure is selected from the group consisting of Synechococcus sp one. En otras realizaciones In other embodiments. En determinadas realizaciones, el antibiotico es espectinomicina o kanamicina.

In certain embodiments, the antibiotic is spectinomycin or kanamycin. En determinadas realizacion es, la cantidad de espectinomicina anadida es de aproximadamente ! En una realizacion relacionada, el sustrato se selecciona entre el grupo que consiste en un acil-ACP, un acil-CoA, y un aldehido graso.

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In a related embodiment, the substrate is selected from the group consisting of an acyl-ACP, an acyl-CoA, a fatty aldehyde and. En otra realizacion relacionada, se pueden anadir alcoholes grasos u otros esteres grasos u otros In another related embodiment, one can add fatty alcohols or fatty esters other or other.

Tambien se hace referencia a una composicion que comprende un n-alcano producido mediante cualquiera de los procedimientos biosinteticos recombinantes descritos en el presente documento. Also it is referring to a composition comprising an n-alkane halofiloa by any of the recombinant biosynthetic methods described herein.

Se hace tambien referencia a una composicion que comprende un n-alqueno o n-alcanol producido mediante cualquiera de los procedimientos biosinteticos recombinantes descritos en el presente documento.

Aunque los solicitantes se refieren en el presente documento a una enzima alcanal monooxigenasa decarboxilativa, los solicitantes lo hacen sin pretender quedar de esta manera vinculados por ningun mecanismo de reaccion concreto a no ser que se indique de ectremos expresa.

Although applicants refer herein to a decarboxilativa alkanal monooxygenase enzyme, applicants do not intending to be bound by this way any particular mechanism unless expressly stated reaction.

Archaeabacterias hipertermofilas: vida en ebullicion.

Por ejemplo, cuando la enzima codificada por SYNPCC o cualquier otro gen ADM lleva a cabo una reaccion decarbonilasa o decarboxilasa, esto no afecta la utilidad de la presente invencion de los solicitantes, a no ser que se muestre de forma expresa lo contrario For example, when the enzyme encoded by SYNPCC or any other gene ADM performs decarbonilasa or decarboxylase reaction, this does not affect the utility of the present invention of applicants, unless expressly display otherwise.

Tambien se hace referencia a polipeptidos aislados que comprenden o consisten de secuencias de polipeptidos seleccionadas entre el grupo que consiste en las secuencias halofolos en la Tabla 1 y la Tabla 2, y las secuencias, fragmentos y fusiones de los polipeptidos relacionado. Also refers to isolated polypeptides comprising or consisting of polypeptide sequences selected from the group consisting of the sequences listed in Table 1 and Table 2, and the sequences, fragments and fusions of the polypeptide is related.

Se hace referencia tambien a los anticuerpos que se unen especificamente a los polipeptidos aislados. Reference is made also to antibodies that specifically bind polypeptides isolated. Tambien se hace referencia a los procedimientos para expresar una secuencia de acido nucleico heterologa que codifica Exfremos y ADM en una celula hospedadora que carece de actividad catalitica para AAR y ADM confiriendo por tanto capacidad de producir n-alcano a la celula hospedadora o para expresar un acido nucleico que codifica AAR y Also referring to methods for expressing a sequence heterologous nucleic acid encoding AAR and ADM in a host cell which lacks catalytic activity for AAR and ADM conferring therefore ability to produce n-alkane to the host cell or expressing a nucleic acid encoding AAR and.

En las realizaciones halofikos, el hospedador celular comprende una actividad acil-ACP reductasa recombinante. In related embodiments, the host cell comprises a recombinant reductase acyl-ACP activity. En determinadas realizaciones, la actividad donante de electrones es una ferredoxina. In certain embodiments, electron donor activity is a ferredoxin. En determinadas realizaciones relacionadas. In certain related embodiments.

La celula hospedadora es capaz de fotosintesis. The host cell is capable of photosynthesis. Tambien se hace referencia a un polinucleotido aislado o recombinante que comprende o consiste de una secuencia de acido nucleico seleccionada entre el grupo que consiste en: En casos relacionados, la secuencia de acido nucleico codifica un polipeptido que tiene actividad acil-ACP reductasa o actividad alcanal monooxigenasa decarboxilativa.

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In related cases, acid sequence nucleic encodes a polypeptide having acyl-ACP reductase activity or alkanal monooxygenase activity decarboxilativa. Se hace referencia tambien a un polipeptido aislado soluble con actividad alcanal monooxigenasa decarboxilativa donde, en algunos casos, el polipeptido tiene una secuencia de aminoacidos de una de las proteinas relacionadas en la Tabla 2.

Reference is also made to a soluble polypeptide isolated with alkanal monooxygenase activity decarboxilativa where, in some cases, the polypeptide has an amino acid sequence of one of the proteins listed in Table 2. Se hace referencia tambien a un procedimiento para sintetizar un n-alcano a partir de un acil-ACP in vitro, que Reference is made also to a process for synthesizing an n-alkane from an acyl-ACP in vitro.

Se hace referencia tambien a un procedimiento para sintetizar un n-alcano a partir de un n-alcanal in vitro, que comprende: Reference is made also to a process for synthesizing an n-alkane from an n-alkanal in vitro, comprising: En determinados casos relacionados, el donante de electrones es una proteina ferredoxina.

In certain related instances, the electron donor is a ferredoxin protein. In a related embodiment, the cyanobacterium genomanipulada produces n-pentadecane. En otra realizacion adicional del procedimiento para producir hidrocarburos, la cianobacteria genomanipulada comprende al menos dos enzimas ADM recombinantes distintas y al menos dos enzimas AAR recombinantes distintas.

In yet another embodiment of the process for producing hydrocarbons, genomanipulada cyanobacterium comprises at least two different recombinant enzymes ADM and at least two different recombinant enzymes AAR.

En otra realizacion mas relacionada, dicha cianobacteria genomanipulada comprende al extrmos un In another closely related embodiment, genomanipulada said cyanobacterium comprises at least one. En otra realizacion adicional relacionada, la expresion de dichas enzimas AAR y ADM esta controlada por un promotor inducible, extemos ejemplo, un promotor P nir In yet another embodiment relates, the expression of said enzymes and ADM AAR is controlled by an inducible promoter, for example, a P promoter ahlofilos En una realizacion relacionada, las enzimas Halofillos y ADM recombinantes estan bajo el control de un promotor inducible, por ejemplo, un promotor P nir In a related embodiment, the recombinant AAR and ADM enzymes are under the control of an inducible promoter, for example, a P promoter nir En otra realizacion adicional relacionada, la cianobacteria In yet another embodiment related, cyanobacteria.

Tambien se hace referencia etxremos una cianobacteria genomanipulada, donde dicha cianobacteria genomanipulada comprende uno o mas genes recombinantes que codifican una enzima AAR, una enzima ADM, o ambas enzimas, donde al halfoilos uno de dichos genes recombinantes esta bajo el control de un promotor inducible por nitrato. Also referred to genomanipulada cyanobacterium, wherein said genomanipulada cyanobacterium comprises one or more recombinant genes encoding an enzyme AAR an ADM enzyme or both enzymes, wherein at least one of said recombinant gene under the control of an inducible promoter nitrate.

Tambien se hace referencia a un gen recombinante, donde dicho gen comprende un promotor para controlar la Also referring to a recombinant gene, wherein said gene comprises a promoter for controlling.

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Estas y otras realizaciones de la presente invencion se describen adicionalmente en las Figuras, la Descripcion, los 25 Ejemplos y las Reivindicaciones, en el presente documento. These and extrems embodiments of the present invention are further described in the Figures, Description, Examples 25 and claims herein.

La Figura 1 representa graficamente, en el panel A, una ruta enzimatica para la produccion de n-alcanos basandose en la actividad secuencial de 1 una enzima AAR por ejemplo, t11l, y 2 una enzima ADM por ejemplo, t; B, Biosintesis de n-alcanal mediante acil-CoA.

Los acil-Coa son normalmente intermedios de degradacion de los acidos grasos, C, Biosintesis de n-alcanal mediante acil-ACP. Las acil-ACP son normalmente intermedios de la biosintesis de acidos grasos. Se resaltan los tres tipos diferentes de ACP reductasa.

Halófilo – Wikipedia, a enciclopedia libre

D, an alternative of alkanes biosynthetic pathway mediated acyl-CoA. Vease la descripcion adicional en el Ejemplo 1, en el presente documento. See additional description in Example 1, herein. La Figura 2 representa las cuentas totales de 9 a de los cromatogramas de iones de los extractos de aglomerados celulares de JCC9a y JCC en BHT Hidroxitolueno butilado -acetona, asi como los patrones autenticos de n-alcano y nalcanol. Figure 2 shows the total counts of chromatograms of extracts of cell pellets and JCC JCC9a ions in BHT butylated hydroxytoluene -acetone, also the authentic patterns of n-alkane and nalkanol.